牛樟芝HPLC檢驗報告超過100%合理嗎？是否誇大不實？迷思大破解
你知道檢驗牛樟芝的方法— HPLC是甚麼嗎？今天學院不說太過艱深的學理，用最簡單的方式告訴你牛樟芝HPLC檢驗法的基礎知識、看牛樟芝三萜檢驗報告時，數值要從何看起？HPLC檢測三萜與靈芝三萜比色法有什麼不同？此外，本文也一併整理關於牛樟芝常見的檢驗數值疑問，讓你不再霧煞煞！
HPLC的檢測原理
在說明HPLC前，我們必須先了解「液相層析法」，它的原理是透過「固定相」與「流動相」之間的分子大小差異或化學特性產生的相互吸引程度不同，因而能夠分離出混合物中的不同純物質，並計算含量。
再更白話一點來比喻，我們可以把層析管柱想像成一條塞滿人的商店街，商店街上有販售各式不同的攤販，逛街的人群也是來自不同年齡層，有各自的喜好與特性。商店街的人流只能有單一方向，從入口進入市集後，民眾會因為喜歡的商品不同，停留在商店街的時間也有所不同，如：婆婆媽媽可能較容易在日常用品攤販停下腳步；男性可能對於3C用品或家電更感興趣，但停留時間較短；小孩則會長時間駐足在遊戲區或玩具店。不同的特性的人群會有不同的停留時間、造成離開市集的時間也有所不同。
顧名思義，液體作為流動項稱為「液項層析法」，而HPLC可以說是「進階版」的液相層析，一般的液項層析法是單純使用重力來分離混合物，分析耗時較長，HPLC則利用高壓幫浦加速液體在細小的管柱間通過，達到更快分離的目的。
前面提到，HPLC是透過管柱內「固定相」和「流動相樣品中的各物質親和力差異」來分離樣品中的成分，最終分離出的時間及訊號會透過偵測器顯示在電腦中，形成有波峰的圖譜。這個圖譜可以說是樣品的「家族圖譜」，裡面藏有樣品所有成分的資訊。
接著，我們進一步了解圖譜該如何解讀，解讀HPLC 圖譜主要看2個重點：
- 橫軸是「保留時間 」(Retention Time, RT)，代表物質停留在管柱的時間，即進入管柱到出管柱的時間，分析特定停留時間點的訊號波峰，應屬於某種物質。
- 縱軸是「訊號強度」，當訊號越強，就代表該物質含量越高。
透過計算波峰面積或高度來定量，一個波峰訊號就代表一個純物質，會透過電腦計算訊號(波峰)的曲線下面積或高度來確定物質含量。
我們舉一個例子：從下方示意圖可以看到，隨著流動相（待測物）被打入管柱後，偵測器連結訊號有兩個訊號，停留在管柱內分別為2分鐘和5分鐘，一個訊號波峰即代表一個物質。
HPLC如何分析牛樟芝中的成分並計算各成分含量？
若受測的樣品有多種混合物，就可能會有多個波峰訊號。那如何確定「要測的樣品中的目標物質」實際有多少呢？HPLC在定量時，會用到的定量方式可分為：歸一化法、外標法或內標法……等等，而牛樟芝檢測使用的是「外標法」，因此我們就來談談：HPLC中的外標法是甚麼？
我們可以把這個定量方式比喻為小時候會在家中使用牆上的身高刻度做測量，也就是用「同一把尺量所有人」的概念。
外標法是分析有多種混合物的樣品最常用的方式。在牛樟芝的樣品檢測中，會先拿一個「已知其內容物」及「濃度」的標準品去跑HPLC，計算標準品出現的峰值面積，以得到的波峰面積做為參考標準，接著再分析待測物的HPLC峰值/面積，把它與標準品做比較。優點是較簡單且快速，適合標準品不容易取得或容易不穩定的檢驗項目，但缺點是分析結果十分仰賴操作人員及儀器的穩定性，若是操作人員將樣品注入機器中的量少抽0.1微升，計算出的結果就可能會產生較大的誤差值。
檢驗報告上的百分比數值的含意與爭議
隨著資訊的取得更方便、專業的資訊能夠更淺顯易懂的被傳播，對於牛樟芝的分析報告，我們已經能夠確定牛樟芝的檢驗報告若是使用HPLC分析方式，相較比色法(或呈色法)來說會更為精準、更具說服力。
針對HPLC檢測報告結果，常見的爭議有：HPLC報告的百分比大於100%是否合理呢？有些產品檢驗報告百分比的三萜含量為400%~700%是否有誇大的嫌疑？
在解答之前，先想看看這個數值的含意。請看下方示意圖，以嘉南藥理大學的研究報告來說，此百分比數值代表的是「樣品」相較「標準品」的濃度百分比。在這樣的呈現方式下，優點是很直覺，能夠一眼看出樣品與標準之間的差距百分比，但缺點是不夠客觀。為什麼不客觀? 因為會出現「拿什麼作為標準，就決定你的樣品看起來有多厲害」。
以下做簡單的比喻更易於理解：以身高來說，180公分高相對於不同比較對象的倍數截然不同。
|
對於 90cm 孩童 來說 (比較標準 1) |
對於 160cm 孩童 來說 (比較標準 2) |
|
|---|---|---|
| 180cm 男性 (比喻為牛樟芝樣品) | 2倍 (200%) | 1.12倍 (112%) |
這就是以標準品相比所得的百分比會出現的偏誤，從科學的角度來說，這種數值的呈現方式是不客觀的。同樣的東西，隨著比較的標準改變，百分比看起來就有完全不同的面貌。
接著來回答，這樣到底是不是有誇大的嫌疑？
答案是—可以說它沒有造假、只是百分比的呈現方式能巧妙的讓人在判讀數字時，在「感受上」使這個數值看起來非常高，對牛樟芝業者來說可以提高消費者購買的衝動與對產品的信心，不過不同產品間的三萜含量若真的要比較，還是必須看確切每公克樣品有多少毫克三萜（mg/g），才是最客觀和不會被誤導的方式。說到選購牛樟芝產品，光是如何判斷檢驗告是否可信、怎麼判讀就有不少技巧，學院也會陸續更新牛樟芝選購系列，公開選購的基本知識與原則，幫助消費者盡可能選到更優良、更適合自己的產品。
HPLC本身的優勢即為能夠精準的「定量」，使用相對百分比來比較屬於較籠統的標示方法，主打百分比的商家可能是想讓民眾易於理解並產生購買衝動，便逐漸出現這樣的行銷方式。總結以上來說，我們建議精準的看「實際含量」（即mg/g的數值）更為精準與客觀，更不容易因為錯誤解讀而衝動消費。 |
Q&A 常見疑問與判斷技巧
Q1：不同商家網頁上主打「牛樟芝三萜類9%」與「牛樟芝三萜類600%」差異在哪裡？「牛樟芝三萜類600%」明顯比較優秀，但似乎哪裡怪怪的？
A：解讀檢驗報告的數值的重點1：百分比的定義（含意）是甚麼。
- 牛樟芝三萜類9%—通常指的是三萜含量佔所有成分的相對百分比，通常不超過100%，因為百分比的數值含意為「所有成分加總為100%」，因此任何成分最多為100%，不可能超過。不過這樣的標示方式經常是使用比色法，數值存在較大的誤差。
- 牛樟芝三萜類600%—通常指的是三萜含量和標準品牛樟芝的三萜含量相對百分比，因此可能超過100%。兩者數據會差異這麼大是源自於「定義上的不同」，定義不同時就難以擺在一起比較，這也是牛樟芝三萜數值經常讓消費者感到疑惑的原因。
不同產品的三萜含量比較，建議需客觀的看HPLC的定量值—每克樣品有多少毫克的三萜類（mg/g）。如果網站上僅標示數值未提供報告，所描述的百分比其實無從證明，建議購買時再多做思考及比較，避免掉入行銷圈套而衝動購買。
Q2：看到百分比相當高的牛樟芝檢驗報告時（如：兩項產品牛樟芝三萜類分別為700%與390%），商家同時都有提供檢驗報告證明是使用HPLC檢測法。 這樣的狀況下，數值更高的產品跟他牌相比三萜含量更高，對嗎？
A：理論上來說是可以這麼判讀，但魔鬼藏在細節裡，真正的答案是「不一定」。
接著提到解讀檢驗報告的數值的重點2：檢驗物為何？結合前一個問題的重點1：
- 當我們確定兩個產品皆以HPLC的分析方式定量
- 同時確認主打600%的該產品mg/g數值更高
務必再進一步判斷檢驗的樣品（檢驗物）為何，是不是高濃度的濃縮萃取物？
消費者可以透過觀察檢驗報告中的「樣品描述」來判斷：一般高濃度的濃縮萃取物用做為「原料」，適度稀釋後用來製成牛樟芝產品銷售。但是，不少商家會送濃縮萃取物去驗三萜，得到數值超漂亮的三萜檢測報告，然後將此報告放在產品網頁中，讓消費者產生「該品牌牛樟芝三萜值驚人地高的誤解」，這點消費者一定要懂得辨別、避免上當。學院之前曾寫過一篇文章詳細的描述相關細節，若想更清楚了解可以參考延伸閱讀[檢驗報告]。
Q3：牛樟芝檢驗報告中，使用「比色法」與「HPLC液項層析法」檢測三萜有何差異？
比色法又稱為呈色分析法，主要是利用分光光度計測量樣品顏色深淺，藉以評估三萜含量。三萜類為多種化合物的總稱，靈芝或桑黃等菇菌類中也含有三萜類，比色法難以分辨牛樟芝與其他三萜的差異，且比色法很大的缺點是較容易受到添加物而干擾結果而大大高估檢測數值，因此，比色法通常只作為「初步檢測產品中三萜類化合物的總含量」，不能夠作為產品含有牛樟芝特有的三萜類之依據。
因此，在牛樟芝的檢驗報告中使用HPLC檢測會優於比色法(現SGS使用方式)，也期許廠商為了消費者做更多的努力，認真堅守原料品質、透明公開不參偽，共同打造雙贏的市場。
針對各間廠商牛樟芝的評比，學院今年已整理出最新的商品評比，提供消費者參考：
