【抗乳癌1】 牛樟芝抑制人類乳癌細胞繁殖經體內與體外實驗 Antrodia camphorata inhibits proliferation of human breast cancer cells in vitro and in vivo

癌症治療–乳癌1 (Breast Cancer Therapy)

    • 牛樟芝(NiuChangChih, Antrodia cinnamomea)發酵液能造成兩種乳癌細胞(MCF-7與MDA-MB-231)死亡,濃度增加越明顯
    • 在動物實驗中,高劑量牛樟芝發酵液對於乳癌腫瘤有明顯抑制效果,7隻裸鼠中有2隻的腫瘤已萎縮到看不見,4隻腫瘤明顯變小,顯示牛樟芝對於抑制腫瘤增生具有明顯的效果!!

論文發表在國際期刊: Food and Chemical Toxicology (食品與化學毒理學)

根據衛生福利部發布的102年癌症統計資料顯示,乳癌持續高居台灣女性癌症之首。平均每天約有28名婦女罹患乳癌、每天有5名婦女死於乳癌,成為婦女最重要的健康議題之一。

乳癌除了侵犯乳房,更可能轉移到遠處器官如骨骼、肺、肝、腦等,造成身體健康之損害,甚至危害生命。

鴻海郭台銘夫人於2005年因乳癌轉移至肝臟、肺臟病逝。冰雪奇緣中文主唱大陸女歌手姚貝娜,2015年僅33歲因乳腺癌復發病逝。

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中國醫藥大學楊新玲教授研究團隊,實驗驗證發現牛樟芝發酵液能導致人類乳癌細胞株MCF-7產生細胞凋亡的作用(凋亡可視為癌細胞的自殺),使凋亡細胞(apoptotic cells)的數量隨著使用劑量的濃度增加而增加。

再進一步以人類乳癌細胞株MDA-MB-231做試驗,其結果為當牛樟芝發酵液的濃度增加且時間延長時,對於乳癌細胞的存活率具有抑制的效果

經5周動物試驗後,進一步將各組裸鼠犧牲,取出各鼠的腫瘤進行體積量測。可以清楚的發現控制組裸鼠的腫瘤大小隨著實驗的時間增加而增加;且高劑量牛樟芝的乳癌腫瘤抑制效果較低劑量好。高劑量牛樟芝發酵液對於乳癌細胞的抑制效果很明顯,7隻裸鼠中有2隻的腫瘤已萎縮至看不見,4隻腫瘤明顯變小,顯示牛樟芝對於抑制腫瘤增生具有明顯的效果

回顧學者們已發表之論文與科學期刊,可知牛樟芝組成成分複雜,用中藥煎煮牛樟芝,並不能達到同樣的抗癌作用唯有透過生物科技,透過專業設備對牛樟芝進行萃取、純化、分離,去除對正常細胞有害的物質,並以活性測試、高效液相層析儀檢驗,才能取得珍貴的牛樟芝活性成分

1. 在細胞週期sub–G1階段,牛樟芝呈現劑量相關性增加癌細胞凋亡

2.牛樟芝透過降低Cyclin, CDK, PCNA數量,進而抑制癌細胞擴散能力

在細胞複製分裂的過程稱為細胞週期(cell cycle),細胞週期分為G1, S, G2, M四階段,每階段的進程是由不同的Cyclin (週期素) ,CDK(周期素依賴性激酶), CKI(CDK抑制因子)所調控 。

下圖左A,Cyclin D1, Cyclin E, CyclinA, CDK, PCNA參與MDA-MB-231乳癌細胞複製,在使用不同牛樟芝劑量(0,40,80,160,240μg/mL)下,經24小時後,可發現Cyclin, CDK, PCNA呈現隨牛樟芝劑量增加而蛋白數量降低
下圖右B, 使用牛樟芝劑量160μg/mL,並每4小時記錄一次,共24小時,可發現Cyclin, CDK, PCNA呈現隨時間增加而蛋白數量降低(減少癌細胞複製)。可見牛樟芝在160μg/mL劑量下,可於24小時內造成癌細胞擴散能力下降

下圖,在不同細胞週期階段(G1, S, G2, M),有不同Cyclin(週期素)負責參與細胞複製。

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3.動物實驗中牛樟芝對抑制癌細胞發展的效果

在動物實驗中,於第0週於皮下植入乳癌細胞MDA-MB-231後,連續五週觀察1.動物體重,2.腫瘤體積,3.腫瘤重量。在五週後會動物將被犧牲,取出乳癌腫瘤並量測其體積與重量。
動物實驗分為五組: 1. 控制組, 2.牛樟芝55mg/kg組, 3.牛樟芝110 mg/kg組, 4.NS-398乳癌藥組

(1)動物體重

所有動物均無體重降低的現象。牛樟芝組(55/110 mg/kg)體重控制在最接近第0週的體重。

(2)腫瘤體積

牛樟芝在抑制癌細胞腫瘤增生上,呈現顯著的劑量與時間相關性。牛樟芝110 mg/kg在抑制腫瘤增生上的效果最顯著,優於乳癌用藥NS-398 (COX-2抑制劑)牛樟芝在腫瘤抑制上相較控制組更有顯著抑癌效果

(3)腫瘤重量

在五週後進行病理解剖,取出各組七隻動物的乳癌腫瘤並量測腫瘤大小與重量。
從下圖實驗結果明顯指出牛樟芝110 mg/kg(紅框)在抗腫瘤擴散的效果最顯著,7隻裸鼠中有2隻的腫瘤已成功抑制乳癌,有4隻腫瘤明顯變小。牛樟芝110 mg/kg抑制腫瘤效果優於乳癌用藥NS-398 (COX-2抑制劑)

下圖是各組取出腫瘤的平均重量,牛樟芝110 mg/kg組的腫瘤重量是各組最低的,有效抑制癌細胞擴散與腫瘤增生,與控制組有顯著差異(p < 0.05)。

4.以免疫組織化學染色法觀察牛樟芝抑制癌細胞擴散

前面的研究發現,牛樟芝有效抑制癌細胞擴散與腫瘤增生。接下來藉由免疫組織化學染色法,從癌細胞切片組織中,進一步量測與癌細胞擴散有關連性的cyclin D1與PCNA蛋白。

下圖,牛樟芝110 mg/kg組顯著減少癌細胞cyclin D1與PCNA 數量,影響G1細胞週期進展,進而達到抑制腫瘤擴散的效果

5.以Bcl-2染色法與TUNEL分析觀察牛樟芝造成癌細胞凋亡

進一步採用 Bcl-2染色法與TUNEL分析觀察牛樟芝造成乳癌細胞凋亡。

下圖左,實驗結果指出牛樟芝110 mg/kg可降低Bcl-2,進而造成癌細胞凋亡
下圖右,透過TUNEL分析指出牛樟芝110 mg/kg造成癌細胞凋亡後的DNA裂解增加,達顯著水準。

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牛樟芝功效 (pharmacological effects of Antrodia cinnamomea)

保護肝臟(hepato-protective)、解酒(anti-hangover)、抗癌(anti-cancer)、抗過敏(anti-allergenic)、增強免疫力(strengthen immune system)、降高血壓(antihypertensive)、降高脂血(antihyperlipemic)、降血糖(anti-diabetic)、免疫調節(immunomodulatory)、抗氧化(anti-oxidant)、抗發炎(anti-inflammatory)

牛樟芝的主要成份 (bioactive components of Antrodia cinnamomea)

三萜類(Triterpenoids)、多醣體(Polysaccharides)、腺苷(Adenosine)、超氧歧化酶(SOD)、麥角固醇(Ergosterol)、羊毛固醇(Lanosterol)、免疫蛋白(Immunity Protein)、維生素(Vitamins)、核酸(Nucleic Acid)、胺基酸(Amino Acid)、苯類(benzenoids)、苯醌衍生物(benzoquinone derivates )、馬來酸(Maleic acid)琥珀酸(Succinic acid)、凝集素(Lectin)、木質素(Lignin)、血壓穩定物質(Antrodia acid)、礦物質(鈣、磷、鐵、鍺等)

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